Seplife ®6FF Fast Flow Agarose Chromatographie Harz

Schnellfluss-Agarose-Chromatographieharz

Seplife 6FF

Seplife ®6FF Fast Flow Agarose Chromatographieharz Produktprofil:

Seplife ® 6FF  Fast-Flow-Agarose-Chromatographieharz  entsteht durch Vernetzung auf Seplife ® 6B  Agarose-Chromatographiemedien Seine chemische Stabilität und seine physikalischen Eigenschaften werden durch hohe Durchflussraten, hohe Beladung und geringe spezifische Adsorption deutlich verbessert. Es hat eine hohe Rückgewinnungsrate und kann mehrfach wiederverwendet werden. Es kann verwendet werden für  Gelfiltrationschromatographie  Und  Reinigung von Proteinen ,  Nukleinsäuren  Und  Peptide  stromabwärts von  Biopharmazeutika und Bioengineering .

Seplife ®6FF Fast Flow Agarose-Chromatographie Harzparameter:

Seplife ®6FF Fast Flow Agarose-Chromatographie Harz  Prüfanleitung:

1.Säulenpackung
Das Verpacken erfolgt nach den Standardarbeitsanweisungen. Es muss sichergestellt werden, dass jedes Material Betriebstemperatur hat und dass das Gel vor dem Verpacken entgast werden muss.
2. Gleichgewicht
Äquilibrieren Sie die Säule mit 2 bis 5 Säulenvolumina der Ladewaage und stellen Sie sicher, dass die Leitfähigkeit und der pH-Wert des Abflusses genau der Leitfähigkeit und dem pH-Wert des Ladepuffers entsprechen.
3. Probenbeladung
(1) Die Probe wird mit einem Puffer vorbereitet, und die trübe Probe wird zum Laden zentrifugiert und gefiltert. Proben mit übermäßigem Salzgehalt und zu geringer Konzentration sollten zuerst behandelt und dann geladen werden.
(2) Die Trennung der Probenkomponenten durch das Medium erfolgt entsprechend dem Molekulargewicht der Komponenten, und das Molekulargewicht wird zuerst herausgeflossen.
(3) Das Ladevolumen beträgt etwa 1–2 % des Säulenvolumens. Je kleiner es ist, desto besser ist die Trennleistung.
4.Elution
Die Elution wurde mit Puffer durchgeführt, wobei die Flussrate und die Pufferzusammensetzung während der Elution konstant gehalten wurden.
5.Regeneration
Es wird normalerweise zum Ausgleich mit einem Puffer gewaschen und kann wieder verwendet werden. Einige inaktivierte Proteine ​​oder Lipide können während der Regeneration nicht abgewaschen werden und können durch In-Place-Reinigung (CIP) entfernt werden.
6.KVP
(1)Bei einem ionengebundenen Protein kann es mit 0,5 bis 1 Säulenbettvolumen 2 M NaCl entfernt werden.
(2) Ausgefällte Proteine, hydrophob gebundene Proteine ​​oder Lipide können mit einem Säulenvolumen 0,1 M NaOH entfernt werden. (3) Stark hydrophob gebundene Proteine, Lipide usw. können mit vier bis zehn Säulenvolumina 70 %igem Ethanol oder 30 %igem Isopropanol gewaschen werden. Dabei ist zu beachten, dass die Konzentration des organischen Lösungsmittels schrittweise und graduell erhöht wird, da sonst leicht Blasen entstehen.
Äquilibrieren Sie die Säule nach Abschluss der Reinigung mit mindestens 3 Bettvolumina Äquilibrierungspuffer, bis pH-Wert und Leitfähigkeit unverändert bleiben.
7.Lagerung
Versiegelt und bei 4–30 °C (20 % Ethanol in Aufbewahrungslösung) gelagert, trocken, belüftet, sauber, nicht gefroren; gebrauchte Säulen werden in 4–30 °C, 20 % Ethanollösung gelagert.

Seplife ®6FF Fast Flow Agarose-Chromatographie Harz  Vorsicht:

(1) Das Probenvolumen sollte vor der Gelfiltration so weit wie möglich konzentriert werden.
(2) Die Probe muss partikelfrei geklärt sein.
(3) Um die höchste Auflösung zu erreichen, darf das Ladevolumen 5 % des Bettvolumens nicht überschreiten.
(4) Nach der Probenentnahme sollte eine Säulenchromatographie durchgeführt werden, und das chromatographische Medium muss gründlich mit dem Elutionspuffer äquilibriert werden.
(5) Das Säulenbett muss eben, frei von Rillen und Luftblasen sein, andernfalls muss es neu zusammengesetzt werden.
(6) Um die Stabilität und Aktivität des Proteins zu schützen, wird ein Pufferreinigungsprotein ausgewählt.
(7)Um unspezifische ionische Wechselwirkungen zwischen Protein und Medium zu vermeiden, können dem Puffer bis zu 0,15 mol/L NaCl zugesetzt werden.
(8) Entsprechend dem Molekulargewicht des Zielproteins wird das Medium ausgewählt, das dem mittleren Trennbereich am nächsten kommt.
(9) Die Durchflussrate sollte während des Elutionsprozesses streng kontrolliert werden und darf nicht zu hoch sein.
(10)Während der Beladung und des gesamten Elutionsvorgangs wird ein Austrocknen der Zylinderoberfläche verhindert.
(11) Dieses Produkt sollte nicht mit Oxidationsmitteln in Berührung kommen und nicht über längere Zeit der Luft ausgesetzt sein.