Fmoc/t-Bu-Festphasensynthese

Die Fmoc-Methode ist eine neue Methode für  Festphasensynthese von Peptiden  von Carpino und Hart basierend auf der Boc-Methode entwickelt.

Der grundlegende Unterschied zwischen der Fmoc/t-Bu(9-fluorenylmethoxycarbonyl/tert-butoxy)-Strategie und der Boc/Bzl-Strategie besteht in der Verwendung von alkalisch entfernbarem Fmoc. Fmoc ist eine Schutzgruppe für die α-Aminogruppe, durch die die Seitenkette geschützt wird t-Bu, das durch TFA entfernt werden kann, und der Festphasenträger Wang-Harz mit säureempfindlichem Verbindungsarm werden verwendet, und der letzte Schritt der Synthese wird durch TFA entfernt. Han Xiang et al. synthetisierten erfolgreich das 32-Peptid-Thymosin 伪 1 durch die Fm oc-Festphasenmethode, ausgehend von Fm oc-Asn(Trt)-W angResin, Boc, das die Seitenketten-Aminogruppe von Lys schützt, und tert-Butylestergruppe (Ot-Bu-Schutz). Die Carboxylgruppe der Seitenkette von Asp und Glu, t-Bu schützt die Hydroxylgruppe der Seitenkette von Ser und Thr und die Tritylgruppe (Trt) schützt die Amidgruppe der Seitenkette von Asn, und die Gesamtsyntheseausbeute beträgt 33,2 % Die Reinheit beträgt >98,8 %.

Die Fmoc-geschützte Aminosäure ist empfindlich gegenüber Basen, insbesondere sekundären Aminen, und kann bei Raumtemperatur mit Piperidin entfernt werden. Unter diesen Bedingungen bleiben Z-basierte, Boc-basierte oder andere Aminoschutzgruppen unberührt.

Die Fmoc-Schutzgruppe ist säurestabil und kann unter milden alkalischen Bedingungen entfernt werden. Es kann orthogonal zu säureempfindlichen Seitenkettenschutzgruppen verwendet werden und bietet die Vorteile milder Reaktionsbedingungen, weniger Nebenreaktionen und hoher Ausbeute. 

Die Reinigung des Produkts wird auch erleichtert, wenn das Polyaryl-Analogon der Fmoc-Schutzgruppe an den N-Terminus des Polypeptids und Proteins gebunden wird. Gleichzeitig weist die Fmoc-Gruppe eine charakteristische UV-Absorption auf und lässt sich leicht überwachen und die Reaktion steuern, sodass sie immer beliebter wird. 

Darüber hinaus wurden mit der Entwicklung der Peptidsyntheseindustrie die Kosten für Fmoc zum Schutz von Aminosäurerohstoffen erheblich gesenkt, und die Fmoc-Methode hat nach und nach die Boc-Methode ersetzt und wird häufig in der Festphasensynthese eingesetzt.