Seplife ®6FF Fast-Flow-Agarose-Chromatographieharz
Schnellfluss-Agarose-Chromatographieharz
Seplife 6FF
Seplife ®6FF Fast Flow Agarose Chromatographieharz Produktprofil:
Seplife ® 6FF Fast-Flow-Agarose-Chromatographieharz entsteht durch Vernetzung auf Seplife ® 6B Agarose-Chromatographiemedien . Seine chemische Stabilität und seine physikalischen Eigenschaften werden bei hohen Durchflussraten, hoher Beladung und geringer spezifischer Adsorption deutlich verbessert. Es hat eine hohe Wiederherstellungsrate und kann viele Male wiederverwendet werden. Es kann verwendet werden für Gelfiltrationschromatographie Und Reinigung von Proteinen , Nukleinsäuren Und Peptide stromabwärts von Biopharmazeutika und Bioingenieurwesen .
Seplife ®6FF Fast Flow Agarose Chromatographie Harzparameter:
| Harzcode | Seplife ® 6FF |
| Aussehen | Weiße Kugelperlen |
| Partikelgröße (脦录m) | 45°C165 |
| Matrix | 6 % vernetzte Agarose |
| Durchflussrate (cm/h) | |
| Druck (MPa) | 0,2 |
| pH-Stabilität | 2~12 (langfristig), 2~14 (kurzfristig, CIP) |
| Anwendung | Proteine, Nukleinsäuren und Peptide nachgeschaltet
Biopharmazeutika und Bioingenieurwesen |
| Chemische Stabilität | Stabil in Wasserpufferlösung:
2M NaOH; 70 % Ethanol, 30 %
Isopropanol, 30 % Acetonitril, 1 % SDS, 6 M Guanidin Hydrochlorid, 8M Harnstoff. |
| Ausschlussgrenze | 10000~4×10&164
165& Globulin |
| Test-Bedingungen:
Chromatographiesäule 16 mm * 300 mm; Säulenbetthöhe 15 cm; Temperatur 25°C;
Die mobile Phase war 0,1 mol/L NaCl. | |
Seplife ®6FF Fast Flow Agarose Chromatographie Harz Testanweisung:
1. Säulenverpackung
Das Verpacken erfolgt gemäß Standardarbeitsanweisungen. Es muss sichergestellt werden, dass jedes Material Betriebstemperatur hat und das Gel vor dem Verpacken entgast werden muss.
2.Gleichgewicht
Äquilibrieren Sie die Säule mit 2 bis 5 Säulenvolumina der Beladungswaage und stellen Sie sicher, dass die Leitfähigkeit und der pH-Wert des Abwassers genau mit der Leitfähigkeit und dem pH-Wert des Beladungspuffers übereinstimmen.
3. Laden der Probe
(1) Die Probe wird mit einem Puffer vorbereitet und die trübe Probe wird zum Beladen zentrifugiert und filtriert. Proben mit zu hohem Salzgehalt und zu geringer Konzentration sollten zuerst behandelt und dann geladen werden.
(2) Die Trennung der Probenbestandteile durch das Medium erfolgt entsprechend dem Molekulargewicht der Komponenten, und das Molekulargewicht wird zuerst ausgeflossen.
(3) Das Ladevolumen beträgt etwa 1–2 % des Säulenvolumens. Je kleiner, desto besser ist die Trennleistung.
4.Elution
Die Elution erfolgte mit Puffer und die Flussrate sowie die Pufferzusammensetzung wurden während der Elution konstant gehalten.
5.Regeneration
Normalerweise wird es zum Ausgleich mit einem Puffer gewaschen und kann wieder verwendet werden. Einige inaktivierte Proteine oder Lipide können während der Regeneration nicht abgewaschen werden und können durch In-Place-Reinigung (CIP) entfernt werden.
6.CIP
(1) Ein ionengebundenes Protein kann mit 0,5 bis 1 Säulenbettvolumen 2 M NaCl entfernt werden.
(2) Ausgefällte Proteine, hydrophob gebundene Proteine oder Lipide können mit 1 Säulenbettvolumen 0,1 M NaOH entfernt werden. (3) Bei stark hydrophob gebundenen Proteinen, Lipiden usw. kann mit 4 bis 10 Säulenvolumina 70 % Ethanol oder 30 % Isopropanol gewaschen werden. Es ist jedoch zu beachten, dass die Konzentration des organischen Lösungsmittels allmählich und in einem Gradienten erhöht wird, da sonst leicht Blasen entstehen.
Nachdem die Reinigung abgeschlossen ist, äquilibrieren Sie die Säule mit mindestens 3 Bettvolumina Äquilibrierungspuffer, bis der pH-Wert und die Leitfähigkeit unverändert bleiben.
7. Lagerung
Versiegelt und bei 4–30 °C (20 % Ethanol in der Aufbewahrungslösung) gelagert, trocken, belüftet, sauber, nicht gefroren; Gebrauchte Säulen werden in 4°C, 20 %iger Ethanollösung gelagert.
Seplife ®6FF Fast Flow Agarose Chromatographie Harz Vorsicht:
(1) Das Probenvolumen sollte vor der Gelfiltration so weit wie möglich konzentriert werden.
(2)Die Probe muss partikelfrei geklärt sein.
(3) Um die höchste Auflösung zu erreichen, darf das Ladevolumen 5 % des Bettvolumens nicht überschreiten.
(4) Die Säulenchromatographie sollte nach der Probe durchgeführt werden und das chromatographische Medium muss gründlich mit dem Elutionspuffer äquilibriert werden.
(5) Das Säulenbett muss flach und frei von Rillen und Luftblasen sein, andernfalls muss es wieder zusammengebaut werden.
(6) Um die Stabilität und Aktivität des Proteins zu schützen, wird ein Pufferreinigungsprotein ausgewählt.
(7)Um unspezifische ionische Wechselwirkungen zwischen Protein und Medium zu vermeiden, können dem Puffer bis zu 0,15 mol/L NaCl zugesetzt werden.
(8) Entsprechend dem Molekulargewicht des Zielproteins wird das Medium ausgewählt, das dem mittleren Trennbereich am nächsten kommt.
(9) Die Flussrate sollte während des Elutionsprozesses streng kontrolliert werden und nicht zu schnell sein.
(10)Während der Beladung und des gesamten Elutionsprozesses wird ein Austrocknen der Zylinderoberfläche verhindert.
(11) Dieses Produkt sollte den Kontakt mit Oxidationsmitteln und eine längere Exposition gegenüber der Luft vermeiden.
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