Fast Flow -Agarose -Chromatographieharz
Seplife 6ff
Seplife® 6ff Fast-Flow-Agarose-Chromatographieharz wird durch Vernetzung auf Seplife® 6b gebildet Agarose -Chromatographie -Medien. Die chemische Stabilität und die physikalischen Eigenschaften werden mit hohen Durchflussraten, hohen Belastungen und niedrigen spezifischen Adsorption erheblich verbessert. Es hat eine hohe Wiederherstellungsrate und kann viele Male wiederverwendet werden. Es kann für verwendet werden für Gelfiltrationschromatographie Und Reinigung von Proteinen, Nukleinsäuren Und Peptide stromabwärts von Biopharmazeutika und Bioengineering.
| Harzcode | Seplife® 6ff |
| Aussehen | Weiße Kugel Perlen |
| Partikelgröße (μm) | 45 ～ 165 |
| Matrix | 6% mit vernetzter Agarose |
| Durchflussrate (cm/h) | <300 |
| Druck (MPA) | 0.2 |
| pH -Stabilität | 2 ~ 12 (langfristig), 2 ~ 14 (kurzfristig, CIP) |
| Anwendung | Proteine, Nukleinsäuren und Peptide stromabwärts von Biopharmazeutika und Bioengineering |
| Chemische Stabilität | Stabil in Wasserpufferlösung: 2m Naoh; 70% Ethanol, 30% Isopropanol, 30% Acetonitril, 1% SDS, 6m Guanidin Hydrochlorid, 8m Harnstoff. |
| Ausschlussgrenze | 10000 ~ 4 × 106 Globulin |
| Test-Bedingungen: Chromatographiespalte 16mm * 300 mm; Säulenbetthöhe 15 cm; Temperatur 25 ℃; Die mobile Phase betrug 0,1 mol / l NaCl. | |
1. Verpackung
Die Verpackung erfolgt gemäß den Standardbetriebsverfahren. Es muss sichergestellt werden, dass jedes Material die Betriebstemperatur hat und dass das Gel vor dem Verpacken entgast werden muss.
2. Gleichgewicht
Äquilibrieren Sie die Säule mit 2 bis 5 Säulenvolumina des Lastbilanzs und stellen Sie sicher, dass die Leitfähigkeit und der pH -Wert des Abwassers genau der Leitfähigkeit und dem pH -Wert des Ladungspuffers entsprechen.
3. Beispielbelastung
(1) Die Probe wird mit einem Puffer hergestellt, und die trübe Probe wird zum Laden zentrifugiert und filtriert. Proben mit übermäßigem Salzgehalt und zu geringer Konzentration sollten zuerst behandelt und dann geladen werden.
(2) Die Trennung der Probenkomponenten durch das Medium wird gemäß dem Molekulargewicht der Komponenten durchgeführt, und das Molekulargewicht wird zuerst herausfließen.
(3) Das Ladevolumen beträgt etwa 1-2% des Säulenvolumens und je kleiner desto besser Trennleistung.
4.selution
Die Elution wurde mit Puffer durchgeführt und die Durchflussrate und die Pufferzusammensetzung wurden während der Elution konstant gehalten.
5. REGENERATION
Es wird normalerweise mit einem Puffer gewaschen und kann wieder verwendet werden. Einige inaktivierte Proteine oder Lipide können während der Regeneration nicht abgespült werden und können durch In-Place-Reinigung (CIP) entfernt werden.
6.Cip
(1) Für ein ionengebundenes Protein kann es mit 0,5 bis 1 Säulenbettvolumen von 2 M NaCl entfernt werden.
(2) Für ausgefällte Proteine, hydrophobisch gebundene Proteine oder Lipide kann es mit 1 Säulenbettvolumen von 0,1 m NaOH entfernt werden. (3) Bei stark hydrophobisch gebundenen Proteinen, Lipiden usw. kann es mit 4 bis 10 Säulenvolumina von 70% Ethanol oder 30% Isopropanol gewaschen werden. Es ist jedoch zu beachten, dass die Konzentration des organischen Lösungsmittels allmählich gradienten gesteigert wird, ansonsten können Blasen leicht erzeugt werden.
Nach Abschluss der Reinigung äquilibrieren Sie die Säule mit mindestens 3 Bettvolumina Gleichgewichtspuffer, bis der pH -Wert und die Leitfähigkeit unverändert bleiben.
7.Storage
Versiegelt und auf 4 ~ 30 ° C gelagert (20% Ethanol in Lagerlösung), trocken, belüftet, sauber, nicht gefroren; Gebrauchte Säulen werden in 4 ℃, 20% Ethanollösung gespeichert.
(1) Das Probenvolumen sollte so weit wie möglich konzentriert sein, bevor die Gelfiltration verwendet wird.
(2) Die Probe muss ohne Partikel geklärt werden.
(3) Um die höchste Auflösung zu erhalten, darf das Ladevolumen 5% des Bettvolumens nicht überschreiten.
(4) Säulenchromatographie sollte nach der Probe durchgeführt werden und das chromatographische Medium muss mit dem Elutionspuffer gründlich äquilibriert werden.
(5) Das Säulenbett muss flach, frei von Rillen und Luftblasen sein, sonst sollte es wieder zusammengesetzt werden.
(6) Um die Stabilität und Aktivität des Proteins zu schützen, wird ein Pufferreinigungsprotein ausgewählt.
(7) Um eine unspezifische ionische Wechselwirkung zwischen Protein und Medium zu vermeiden, können bis zu 0,15 mol/l NaCl zum Puffer gegeben werden.
(8) Gemäß dem Molekulargewicht des Zielproteins wird das Median -Trennungsbereich am nächsten stehen.
(9) Die Durchflussrate sollte während des Elutionsprozesses und nicht zu schnell kontrolliert werden.
(10) Während der Beladung und des gesamten Elutionsprozesses wird die Zylinderoberfläche daran hindert, auszutrocknen.
(11) Dieses Produkt sollte den Kontakt mit Oxidationsmitteln vermeiden und eine längere Exposition gegenüber der Luft vermeiden.
Als Direktor wird Dr. Alessandra Basso unsere Initiativen zur Förderung der Entwicklung unserer Lebenswissenschaftsabteilung in Übersee führen. Sie wird für die Verwaltung von Marketing- und Marketingteams im gesamten Bereich der Life Science verantwortlich sein, Unterstützung für Produkt- und Anwendungstechnologie sowie die Markenpositionierung von Sunresin Seplife -Produktpalette als "hohe Qualität und führende Marke " anbieten und aufbauen und aufbauen. auf dem internationalen Markt.
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